一、物理化学性质
DOTAP,全称(2,3-二油酰基-丙基)-三甲基铵氯盐,CAS号132172-61-3,分子式C₄₂H₈₀ClNO₄,分子量698.54 Da。外观呈浅黄色或白色蜡状固体,熔点约35~38℃。
溶解性:易溶于氯仿、甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂,不溶于水;以氯仿溶液形式供应时浓度可达25 mg/mL。
表面电荷:季铵盐头部在生理pH下保持永久正电荷,Zeta电位通常为+30~+60 mV(脂质体形式)。
稳定性:对热稳定(<100℃),中性至弱碱性条件下结构稳定,强酸环境可水解;光敏易氧化,需避光操作。
储存条件:-20℃避光密封,干燥环境,避免反复冻融;4℃可稳定储存至少12个月(制剂形式)。
二、材料核心介绍与使用指南
DOTAP由亲水季铵盐阳离子头部与两条含顺式双键的C18油酰基疏水尾链构成,可自组装形成阳离子脂质体。其核心机制:正电荷头部与核酸磷酸骨架静电结合,形成lipoplex复合物,经细胞内吞后借助膜融合特性实现内体逃逸,将DNA/RNA释放至胞质。
转染操作要点:
1 配比:DNA(μg):DOTAP(μl)=1:2~1:8,每μg DNA约需5~10 μg DOTAP
2 步骤:将DNA稀释于25 μl无血清培养基,DOTAP同样稀释后混合,上下吹吸(勿振荡),室温孵育15分钟
3 浓度控制:转染混合物中DNA浓度应<5 μg/ml,DOTAP浓度<30~40 μl/ml,过量将引发细胞毒性
4 细胞密度:转染前细胞覆盖度达85%~95%为佳
应用方向:siRNA基因沉默、质粒DNA转染、mRNA递送、疫苗研发、小分子药物负载。
三、瑞禧生物产品供应
西安瑞禧生物科技有限公司围绕DOTAP构建多规格产品矩阵:
基础原料 DOTAP冻干粉 25 mg/50 mg/100 mg/500 mg,纯度≥95%~99%
溶液制剂 DOTAP氯仿溶液 25 mg/mL,科研级
空白脂质体 DOTAP/DOTAP-Chol 冻干粉,粒径80~150 nm
核酸递送 siRNA/mRNA/pDNA@DOTAP 冻干粉或水分散液
功能化产品 FA-DOTAP、Cy5-DOTAP、PEG-DOTAP 靶向/荧光/长循环定制

