一、产品系统基础信息
中文名称:荧光素异硫氰酸酯修饰明胶
英文名称:Gelatin-FITC Conjugate / FITC-Labeled Gelatin
保存条件:-20°C干燥、避光、防潮保存;配制成溶液后推荐分装,避免反复冻融,短期可于4°C保存并添加适量防腐剂
纯度:生物技术级,一般≥95%
保质期:-20°C密封条件下约12个月,具体以批次标注为准
别称:异硫氰酸荧光素标记明胶、Fluorescein Isothiocyanate-Gelatin、Gelatin-Fluorescein
性状:冻干粉或淡黄色至棕黄色固体
部分批次在室温下溶解较慢,可加热至40–50°C或辅以温和超声促进溶解,溶解表现:可溶于水及磷酸盐缓冲液(PBS);亦可溶于稀醋酸溶液(10 mM)
运输条件:低温冰袋运输,避免光照与高温
供应单位:西安瑞禧生物科技有限公司
应用场景:酶活性检测底物、细胞培养示踪、组织工程支架标记、药物载体追踪、生物成像探针
二、系统材料组成与构型性质
明胶修饰荧光素(Gel-FITC)是将异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)借助共价偶联方式标记于明胶分子上构建的荧光复合物。温度升高则逐渐转变为溶胶状态,明胶来源于胶原蛋白的部分水解,是由高平均分子量的水溶性蛋白质组成的生物高分子,在35–40°C以下可吸水膨胀构建凝胶。构建稳定的硫脲键连接,FITC分子构型中含有异硫氰酸基团(-N=C=S),可在弱碱性条件下与明胶分子链上的伯胺基(如赖氨酸残基的ε-氨基)发生亲核加成反应。
三、相应系统材料系统
偶联辅助试剂:包括碳酸盐缓冲液(pH 9.0–9.5)、磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7.4)以及适用于终止反应或纯化的透析袋、凝胶过滤介质等。
下游衍生物与制剂
完成靶向递送与荧光示踪双重功能,荧光明胶纳米粒子(FITC-Gelatin NPs):以Gel-FITC为原料,借助乳化交联、去溶剂化或纳米沉淀法制备的纳米级载体,粒径一般在100–300 nm范围内,可应适用于包载蛋白、多肽或基因药物。
上游原料与修饰试剂
明胶(Gelatin):来源于动物皮肤、骨骼等结缔组织中胶原蛋白的水解产物,是制备Gel-FITC的基质系统材料。用户可依据实验需求选用合适类型,依据提取工艺各类,可分为A型(酸法)和B型(碱法)明胶,其等电点和胶凝性质存在差异。
FITC(异硫氰酸荧光素):分子式C₂₁H₁₁NO₅S,CAS号3326-32-7,属于一类胺活性荧光染料。其异硫氰酸基团可与含伯胺的生物分子构建稳定的硫脲键,是蛋白质、多糖及高分子系统材料荧光标记的常用试剂。
便于实时观察细胞在支架内的黏附、增殖及迁移行为,荧光水凝胶支架:将Gel-FITC与甲基丙烯酰化明胶(GelMA)或其他可交联高分子共混,经光引发或化学交联构建三维多孔支架,适适用于组织工程与细胞三维培养。
配套供应标准缓冲液、阳性对照及检测板,适用于定量分析明胶酶(如MMP-2、MMP-9)和胶原酶的活性,常见于细胞培养上清、组织裂解液或血清样本的检测,酶活性检测试剂盒:以Gel-FITC为荧光底物。
相应检测技术与方法
在Ex/Em ≈ 490/520 nm处测定Gel-FITC被酶解后的荧光释放量,计算蛋白酶活性,荧光光谱检测:利用荧光酶标仪或分光光度计。
荧光显微镜成像:借助共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)或落射荧光显微镜,观察Gel-FITC在细胞或组织切片中的分布与代谢动态。
流式细胞术:将Gel-FITC纳米载体与细胞共孵育后,借助流式细胞仪定量分析细胞对载体的摄取效率及内化程度。
追踪明胶基系统材料在生物体内的降解、分布及代谢途径,细胞与组织示踪:在细胞培养及组织工程科研中,Gel-FITC可应适用于标记细胞外基质成分。
药物传递系统科研:将Gel-FITC纳入纳米载体或水凝胶系统,利用其荧光信号监测载体在体外细胞模型或体内动物模型中的释放行为与靶向分布。
胶原结合蛋白科研:借助Gel-FITC与胶原/明胶结合蛋白的相互作用,科研细胞黏附、迁移及信号转导机制。
凝胶渗透色谱(GPC)与SDS-PAGE:适用于表征Gel-FITC的分子量分布及FITC标记度,评估偶联反应的效率与产物均一性。
四、重点应用场景
可被明胶酶和胶原酶特异性降解,释放荧光片段,借助监测荧光强度变化完成酶活性的定量分析,孵育时间延长可提升检测灵敏度,蛋白酶活性检测:Gel-FITC作为高猝灭荧光底物。
五、操作与保存注意事项
Gel-FITC对光照和温度较为敏感,长期暴露于强光或高温环境会导致荧光漂白或蛋白变性,作用于实验结果。推荐现配现用,溶液状态的产品系统分装后于-20°C冻存,减少反复冻融次数。开展酶活性测定时,需确保反应系统pH值大于7.0,以维持蛋白酶的最适活性及FITC的荧光稳定性。各类来源明胶的氨基酸组成和分子量分布存在差异,可能作用于FITC的标记密度及酶解效率,用户在更换批次时应开展预实验验证

