阳离子脂质体的制备用薄膜水化-超声法制备脂质体。按处方比例称量脂材,溶于盛1 mL氯仿-甲醇( 1 ∶ 1 ,v/ v)的鸡心瓶中,45℃水浴下旋转蒸发除去有机溶剂,使脂材在瓶壁上形成一层均匀的膜,去掉水浴继续抽真空1 ~2 h。取DFA储备液( 100 ug · mL)水化脂膜,涡旋振荡制成脂质体。将脂质体放入水浴中超声5 min,过0.22 um水膜制备粒径均一的脂质体。分别制备由F-PEC-DSPE修饰的叶酸受体靶向脂质体(DPPC/DC-cholF-PEG-DSPE,10 ∶ 10∶0.75,摩尔比)和PEC-DSPE修饰的非靶向脂质体(DPPC/DC-chol/PEG-DSPE,10 :10:0.75 ,摩尔比)。
脂质体粒径及电位测定：将制备的脂质体混悬液稀释至适当倍数,用激光粒度分布仪测定脂质体的粒径大小及分布和电位。
脂质体包封率的测定取包封DFA 的脂质体混悬液0.5 mL加人葡聚糖C-50 凝胶柱( 1cm x15cm)中,以 PBS洗脱未包封的DFA 并收集脂质体,以每份1.5 mL接取,记录洗脱曲线，得到包封DFA的脂质体混悬液。取分离后的包封 DFA的脂质体混悬液0. 1 mL,加入10% Triton X-100溶液0.1mL破坏脂质体,以 PBS稀释到适宜浓度,测定溶液的荧光强度。另取0.1 mL未经分离的脂质体混悬液,同样加入10% Triton X-100溶液0. 1 mL破坏脂质体,用PBS稀释到适宜浓度作为对照液测定荧光强度。经标准曲线换算成浓度后计算包封率。
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