本发明涉及一种医药
技术领域：
，特别是涉及一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物及药物组合物和应用。
背景技术：
：腺苷酸环化酶是(adenylylcyclase，ac)是g蛋白偶联受体(gprotein-coupledreceptors,gpcrs)下游的关键信号分子；胰岛素、肾上腺素等蛋白质及儿茶酚胺类激素均需通过腺苷酸环化酶系统的传递来发挥作用；腺苷酸环化酶是许多细胞跨膜信号转导最终的效应酶。腺苷酸环化酶催化腺嘌呤核苷三磷酸(adenosinetriphosphate，atp)脱去焦磷酸而合成得到环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate，camp)。环磷酸腺苷是细胞内信号转导过程中一种重要的第二信使，能够激活蛋白激酶a(proteinkinasea,pka)调节下游多种蛋白质(包括转录因子)的活性，影响细胞增殖、分化和凋亡等多种生物学进程，从而调节细胞反应。目前发现在哺乳动物细胞中表达的腺苷酸环化酶共有9个跨膜亚型(ac1-ac9)和一个可溶性亚型(ac10)，各亚型在不同组织及细胞中的分布、活性及表达水平不尽一致，使得环磷酸腺苷信号途径具有不同的调节机制，并且参与不同的生理进程。2型腺苷酸环化酶(ac2)广泛分布在大脑、肺、骨骼肌、心脏等组织中。相关研究报道：2型腺苷酸环化酶可能与骨骼肌生理、肺部疾病、神经内分泌肿瘤和结肠直肠癌等有关。相关研究显示：2型腺苷酸环化酶编码基因多态性与神经精神病与肺部疾病相关。现阶段，由于2型腺苷酸环化酶缺乏在小鼠模型上基因敲除或过表达的药理研究，其更多的生理及药理功能尚未被发现。2型腺苷酸环化酶属于g蛋白βγ亚基激活的腺苷酸环化酶类型，2型腺苷酸环化酶的激活可通过内源性物质g-蛋白α亚基及蛋白激酶c(proteinkinasec,pkc)刺激实现。现有技术中，化合物佛司可林(forskolin，fsk)及其衍生物(如下式)是唯一的腺苷酸环化酶小分子激动剂。其中，佛司可林及其衍生物的结构如下：但是，佛司可林及其衍生物对除腺苷酸环化酶9(ac9)以外的8个腺苷酸环化酶(ac1-ac8)跨膜亚型均具有激活作用；佛司可林及其衍生物对9种腺苷酸环化酶跨膜亚型不具有亚型选择性，无法单独激活某一种特定类型的腺苷酸环化酶跨膜亚型，无法选择性的高效激活2型腺苷酸环化酶。另外，现有技术中，尚未有其他化合物可以选择性激活2型腺苷酸环化酶的任何相关报道。技术实现要素：有鉴于此，本发明提供一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物及药物组合物和应用，主要目的在于设计并合成一种式(i)所示的化合物，该类化合物用于制备2型腺苷酸环化酶(ac2)激动剂及用于制备与2型腺苷酸环化酶相关的疾病(神经精神疾病、肺部疾病、气管疾病、支气管疾病)的治疗药物。为达到上述目的，本发明主要提供如下技术方案：一方面，本发明的实施例提供一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物，其特征在于，其结构通式如式(i)所示：其中，r1为如下基团之一：甲苯基、第一饱和脂环烃基、第一链烃基、苯烷基、萘基、联苯基、吡啶基、二氮杂苯基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、噻唑基、卤代苯基、卤素、氢、卤代烷基、烷氧基、烷氧羰基、氨基、烷基氨基，硝基、羟基、羧基、磺酰基、酰胺基；其中，r2为如下基团之一：第二饱和脂环烃基、第二链烃基、卤代苯基、二氮杂苯基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、噻唑基、氢、卤代烷基，烷氧基，烷氧羰基；其中，r3为如下基团之一：氢甲基甲氧基卤素羟基氨基硝基羧酸基氰基磺酸基本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。优选的，所述甲苯基选用优选的，所述第一饱和脂环烃基选用优选的，所述第一链烃基选用如下基团之一：优选的，所述苯烷基选用优选的，所述萘基选用优选的，所述联苯基选用优选的，所述第二饱和脂环烃基为如下基团之一：优选的，所述第二链烃基选用如下基团之一：优选的，所述二氮杂苯基为如下基团之一：优选的，所述卤代苯基优选为优选的，所述吡啶基为如下基团之一：优选的，所述呋喃基为优选的，所述吡咯基为如下基团之一：优选的，所述吡唑基为如下基团之一：优选的，咪唑基为如下基团之一：优选的，噻吩基为优选的，噻唑基为如下基团之一：优选的，所述[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物为以下化合物中的任一种：另一方面，本发明的实施例提供一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物的制备方法，其中，其化学反应方程式如下：优选的，所述制备方法包括如下步骤：利用一锅法将醛n-取代马来酰亚胺重氮分子筛ms及催化剂多聚醋酸铑加入到1,1,2,2-四氯乙烷溶液中，得到反应体系；所述反应体系充惰性气体保护，在设定的反应温度下反应设定时间，得到产物混合物；对所述产物混合物进行过滤、干燥、浓缩、纯化处理，得到[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物。优选的，将所述醛n-取代马来酰亚胺重氮的当量比为(2～4):(2～4):1，总当量数为5～9个当量；所述1,1,2,2-四氯乙烷溶液的用量为5～15ml；所述分子筛的用量为400～800mg；所述催化剂多聚醋酸铑的用量为1-15mg。优选的，所述分子筛选用分子筛。优选的，所述反应温度为80～120℃、反应时间为2～3小时。优选的，对所述产物混合物依次进行硅藻土过滤处理、无水硫酸钠干燥处理、减压浓缩处理、柱色谱纯化处理，得到[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物。再一方面，上述的[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物在制备2型腺苷酸环化酶激动剂中的应用。上述的[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物在制备与2型腺苷酸环化酶相关的疾病的治疗药物中的应用；其中，与2型腺苷酸环化酶相关的疾病包括神经精神疾病、肺部疾病、气管疾病、支气管疾病。再一方面，本发明实施例还提供一种药物组合物，其中，所述药物组合物包括：权利要求1-5任一项所述的[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物和至少一种药学上可接受的辅料。优选的，所述药物组合物用于制备2型腺苷酸环化酶激动剂。优选的，所述药物组合物用于制备与2型腺苷酸环化酶相关的疾病的治疗药物；其中，与2型腺苷酸环化酶相关的疾病包括神经精神疾病、肺部疾病、气管疾病、支气管疾病。与现有技术相比，本发明的[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物及药物组合物和应用至少具有下列有益效果：本发明首次提出式(i)所示结构的[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物，该类化合物的结构新颖、化学上易于合成、成本廉价和副作用小。同时，本发明设计的该类化合物不仅是除了佛司可林(fsk)之外的2型腺苷酸环化酶高效激活剂，而且还可选择性激活2型腺苷酸环化酶，对其他腺苷酸环化酶跨膜亚型无明显激活作用或不激活。因此，本发明的该类化合物具有作为或制备2型腺苷酸环化酶(ac2)激动剂、与2型腺苷酸环化酶相关的疾病(神经精神疾病、肺部疾病、气管疾病、支气管疾病)的治疗药物的用途。上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。附图说明图1是本发明实施例的化合物1分别对人胚肾hek293+hac1、hac2、hac4、hac5、hac8细胞的激动作用初筛信号图；图2是本发明实施例的化合物1对人胚肾hek293+hac2细胞的激动量效曲线图。具体实施方式为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效,以下结合附图及较佳实施例，对依据本发明申请的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如后。在下述说明中，不同的“一实施例”或“实施例”指的不一定是同一实施例。此外，一或多个实施例中的特定特征、结构、或特点可由任何合适形式组合。实施例1本实施例提供一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物，其结构通式如式(i)所示：其中，r1为如下基团之一：甲苯基(优选)、第一饱和脂环烃基(优选)、第一链烃基(优选如下基团之一：)、苯烷基(优选)、萘基(优选)、联苯基(优选)、吡啶基(具体为如下基团之一：)、二氮杂苯基(优选如下基团之一：)、呋喃基吡咯基(具体为如下基团之一：)、吡唑基(具体为如下基团之一：)、咪唑基(具体为如下基团之一：)、噻吩基噻唑基(具体为如下基团之一：)、卤代苯基、卤素氢卤代烷基、烷氧基、烷氧羰基、氨基、烷基氨基，硝基、羟基、羧基、磺酰基、酰胺基。优选的，r1为如下基团之一：其中，r2为如下基团之一：第二饱和脂环烃基(优选如下基团之一：)、第二链烃基(优选如下基团之一：)、卤代苯基(优选为)、二氮杂苯基(优选为如下基团之一：)、呋喃基吡咯基(具体为如下基团之一：))、吡唑基(具体为如下基团之一：)、咪唑基(具体为如下基团之一：)、噻吩基噻唑基(具体为如下基团之一：)、氢、卤代烷基，烷氧基，烷氧羰基。优选的，r2为如下基团之一：其中，r3为如下基团之一：氢甲基甲氧基卤素羟基氨基硝基羧酸基氰基磺酸基r3为苯环上任一位置的取代基。另外，本实施例还提供一种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物的制备方法，其中，其化学反应方程式如下：具体制备步骤为：利用三组分一锅法将醛n-取代马来酰亚胺重氮三种化合物按照4:4:1当量比加入到5-15ml的1,1,2,2-四氯乙烷溶液中，并在溶液中加入400-800mg的分子筛及0.2个当量催化剂多聚醋酸铑，体系充氩气保护，在80℃下反应2-3小时。原料反应完全后，待反应后得到的混合物(即，产物混合物)冷却后，用硅藻土过滤，并用无水硫酸钠干燥，再减压浓缩，柱色谱纯化得通式(i)所示化合物。实施例2在实施例1的基础上，本实施例列举20种[吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物的制备方法及其结构测定数据。具体如下：1、化合物1当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物1；其结构式如下：化合物1的制备方法如下：具体制备步骤如下：将2-重氮-1,3-茚二酮(100mg，0.58mmol)、对甲基苯甲醛(279mg，2.32mmol)、n-邻氯苯基马来酰亚胺(482mg，2.32mmol)、多聚醋酸铑(2.57mg，0.006mmol)及500mg粉末型分子筛加入到7ml的1,1,2,2-四氯乙烷中，氩气保护下，体系在80℃下反应2-3小时，原料反应完全，得到混合物。待混合物冷却后，对混合物进行硅藻土过滤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩、柱色谱纯化得到化合物1，白色粉末状固体，产率65.66％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.10-8.06(m,2h),7.97-7.95(m,2h),7.54-7.35(m,6h),7.18-7.16(m,2h),6.12(d,j＝7.40hz,1h),4.11(dd,j＝7.40,8.36hz,1h),3.93(d,j＝8.36hz,1h),2.32(s,3h)ppm.ei-mscalc.forc27h18clno5:471；found:471(m).2、化合物2当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物2；其结构式如下：化合物2的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物2的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成环丙基甲醛即得化合物2，产率55.67％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05-8.01(m,2h),7.97-7.93(m,2h),7.65-7.63(m,1h),7.53-7.51(m,1h),7.47-7.42(m,2h),4.26(dd,j＝6.52,9.04hz,1h),3.87(dd,j＝8.32,14.92,1h),1.39(m,1h),0.75(m,2h),0.48(m,2h)ppm.ei-mscalc.forc23h16clno5:421；found:421(m).3、化合物3当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物3；其结构式如下：化合物3的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物3的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成异丁醛即得化合物3，产率63.37％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.06-8.01(m,2h),7.97-7.91(m,2h),7.68(dd,j＝1.60,7.72hz,1h),7.52-7.39(m,3h),4.54(dd,j＝5.76,10.28hz,1h),3.91-3.88(m,1h),3.83(d,j＝8.04,1h),2.37-2.27(m,1h),1.21(d,j＝6.60hz,1h)，1.04(d，j＝6.48hz，1h)ppm.ei-mscalc.forc23h18clno5:423；found:423(m).4、化合物4当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物4；其结构式如下：化合物4的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物4的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成环己基甲醛即得化合物4，产率58.74％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05-8.03(m，2h)，7.96-7.93(m，2h)，7.71(dd，j＝1.44,7.64hz,1h),7.52-7.39(m,3h),4.60(dd,j＝5.72,10.24hz,1h),3.92-3.88(m,1h),3.81(d,j＝8.04,1h),2.25(d,j＝11.73,1h),2.11-1.96(m,2h),1.76-1.66(m,4h),1.42-0.83(m,6h)ppm.ei-mscalc.forc26h22clno5:463；found:463(m).5、化合物5当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物5；其结构式如下：化合物5的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物5的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成3-甲基-2-丁烯醛即得化合物5，产率52.64％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.06-8.02(m,2h),7.97-7.91(m,2h),7.67(dd,j＝1.54,7.62hz,1h),7.53-7.40(m,3h),2.75-5.71(m,1h),3.92-3.88(m,1h),5.65-5.63(m,1h),3.86-3.85(m,2h),1.81(s,6h)ppm.ei-mscalc.forc24h18clno5:435；found:435(m).6、化合物6当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物6；其结构式如下：化合物6的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物6的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成正丁醛即得化合物6，产率61.33％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05-8.03(m,2h),7.97-7.91(m,2h),7.67(dd,j＝1.64,7.60hz,1h),7.53-7.40(m,3h),5.00-4.95(m,1h),3.84-3.83(m,2h)，2.08-1.99(m，1h)，1.92-1.82(m，1h),1.61-1.52(m,2h),0.97(t,j＝7.36hz,3h)ppm.ei-mscalc.forc23h18clno5:423；found:423(m).7、化合物7当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物7；其结构式如下：化合物7的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物7的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成2-乙基-2-丁烯醛即得化合物7，产率59.15％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.05-8.03(m，2h)，7.97-7.92(m，2h),7.50-7.38(m,4h),5.70(t,j＝7.32hz,1h),5.48(d,j＝7.45hz,1h),3.99-3.95(m,1h),3.37-2.28(m,1h),2.10-1.98(m,3h),1.41-1.32(m,2h),1.08-1.03(m,3h),0.87(t,j＝7.36hz,3h)ppm.ei-mscalc.forc27h24clno5:477；found:477(m).8、化合物8当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物8；其结构式如下：化合物8的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物8的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成2-乙基-2-丁烯醛即得化合物8，产率63.24％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05-8.03(m,2h),7.97-7.92(m,2h),7.63-7.61(m,1h),7.52-7.40(m,3h),4.90(dd,j＝5.64,13.16hz,1h),3.85-3.84(m,2h),2.15-2.04(m,1h),1.97-1.86(m,1h),1.12(t,j＝7.38hz,3h)ppm.ei-mscalc.forc22h16clno5:409；found:409(m).9、化合物9当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物9；其结构式如下：化合物9的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物9的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成苯乙醛即得化合物9，产率52.19％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05-8.01(m,2h),7.96-7.90(m,2h),7.20-7.69(m,1h),7.55-7.42(m,3h),7.39-7.19(m,5h),5.25-5.20(m,1h),3.92-3.83(m,2h),3.52(dd,j＝5.32,14.60hz,1h),3.17(dd,j＝7.98,14.70hz,1h)ppm.ei-mscalc.forc27h18clno5:471；found:471(m).10、化合物10当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物10；其结构式如下：化合物10的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物10的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成苯丙醛即得化合物10，产率50.63％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.06-8.04(m,2h),7.98-7.92(m,2h),7.64-7.61(m,1h),7.52-7.39(m,3h),7.29-7.17(m,5h),5.00-4.94(m,1h),3.84-3.83(m,2h),2.86(t，j＝7.76hz，2h)，2.42-2.31(m，1h)，2.29-2.18(m,1h)ppm.ei-mscalc.forc28h20clno5:485；found:485(m).11、化合物11当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物11；其结构式如下：化合物11的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物11的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成2-萘甲醛即得化合物11，产率48.32％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.15-8.13(m,1h),8.07-7.83(m,8h),7.75-7.71(m,1h),7.55-7.42(m,5h),6.07(d,j＝6.72hz,1h),4.35(d,j＝10.39hz,1h),4.06(dd,j＝6.84,10.27hz,1h)ppm.ei-mscalc.forc30h18clno5:533；found:533(m).12、化合物12当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物12；其结构式如下：化合物12的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物12的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料对甲基苯甲醛替换成4-联苯甲醛即得化合物12，产率48.32％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.14-8.11(m,1h),8.06-8.04(m,1h),7.99-7.93(m,2h),7.68-7.33(m,15h),5.95(d,j＝6.80hz,1h),4.32(d,j＝10.32hz,1h),4.02(dd,j＝6.86,10.30hz,1h)ppm.ei-mscalc.forc32h20clno5:533；found:533(m).13、化合物13当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物13；其结构式如下：化合物13的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物13的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-环戊基马来酰亚胺即得化合物13，产率70.24％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12-8.09(m,1h),8.05-8.02(m,1h),7.98-7.93(m,2h),7.29(d,j＝7.96hz,2h),7.18(d,j＝7.92hz,2h),6.03(d,j＝7.92hz,1h),4.39-4.31(m,1h),3.80(t,j＝8.16hz,1h),3.57(d,j＝8.36hz,1h),2.35(s,3h),2.07-2.00(m,1h),1.92-1.81(m,5h),1.55-4.521(m,2h),ppm.ei-mscalc.forc26h23no5:429；found:429(m).14、化合物14当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物14；其结构式如下：化合物14的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物14的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-异丁基马来酰亚胺即得化合物14，产率74.18％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.05-8.03(m,1h),7.97-7.95(m,2h),7.30(d,j＝7.88hz,2h),7.17(d,j＝7.80hz,2h),6.08(d,j＝7.88hz,1h),3.86(t,j＝8.12hz,1h),3.63(d,j＝8.36hz,1h),3.25(d,j＝7.32hz,3h),2.35(s,3h),2.04-1.95(m,1h),0.94(dd,j＝6.64,20.48hz,6h)ppm.ei-mscalc.forc25h23no5:417；found:417(m).15、化合物15当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物15；其结构式如下：化合物15的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物15的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-异丙基马来酰亚胺即得化合物15，产率72.25％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.05-8.02(m,1h),7.98-7.93(m,2h),7.30(d,j＝7.96hz,2h),7.18(d,j＝7.88hz,2h),6.03(d,j＝7.84hz,1h),4.31-4.24(m,1h),3.79(t,j＝8.12,1h)，3.57(d，j＝8.36hz,1h),2.35(s,3h),1.36(dd，j＝6.94,14.26hz,6h)ppm.ei-mscalc.forc24h21no5:403；found:403(m).16、化合物16当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物16；其结构式如下：化合物16的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物16的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-叔丁基马来酰亚胺即得化合物16，产率68.24％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.04-8.01(m,1h),7.97-7.92(m,2h),7.32(d,j＝7.96hz,2h),7.18(d,j＝7.88hz,2h),6.04(d,j＝8.00hz,1h),3.69(t,j＝8.20,1h),3.45(d,j＝8.44hz,1h),2.35(s,3h),1.50(s,6h)ppm.ei-mscalc.forc25h23no5:417；found:417(m).17、化合物17当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物17；其结构式如下：化合物17的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物17的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-环丙基马来酰亚胺即得化合物17，产率70.56％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.05-8.03(m,1h),7.98-7.93(m,2h)，7.24(d，j＝8.20hz，2h),7.18(d,j＝7.96hz,2h),6.02(d,j＝7.92hz,1h),3.81(t,j＝8.12,1h),3.58(d,j＝8.32hz,1h),2.48(m,1h),2.35(s,3h),1.09-1.03(m,1h),1.00-0.86(m,2h),0.76-0.69(m,1h)ppm.ei-mscalc.forc24h19no5:401；found:401(m).18、化合物18当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物18；其结构式如下：化合物18的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物18的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-环己基马来酰亚胺即得化合物18，产率73.63％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.05-8.03(m,1h),7.98-7.93(m,2h),7.29(d,j＝7.92hz,2h),7.18(d,j＝7.84hz,2h),6.03(d,j＝7.84hz,1h),3.92-3.85(m,1h),3.78(t,j＝8.12,1h),3.58(d,j＝8.32hz,1h),2.35(s,3h),2.15-1.93(m,2h),1.78-1.79(m,2h),1.68-1.59(m,3h),1.31-1.14(m,3h)ppm.ei-mscalc.forc27h25no5:443；found:443(m).19、化合物19当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物19；其结构式如下：化合物19的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物19的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-甲基马来酰亚胺即得化合物19，产率68.91％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.11-8.09(m,1h),8.06-8.04(m,1h),7.99-7.94(m,2h),7.28(d,j＝8.00hz,2h),7.18(d,j＝7.92hz,2h),6.04(d,j＝7.76hz,1h),3.88(t,j＝8.00,1h),3.65(d,j＝8.20,1h),2.96(s,3h),2.35(s,3h)ppm.ei-mscalc.forc22h17no5:375；found:375(m).20、化合物20当式(i)中的r1为r2为r3为h时，所得到的化合物为化合物20；其结构式如下：化合物20的制备方法如下：具体制备步骤如下：化合物20的制备步骤与化合物1的制备步骤类似，只需将化合物1制备步骤的原料n-邻氯苯基马来酰亚胺替换成n-环丁基马来酰亚胺即得化合物20，产率68.91％。结构测定数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12-8.10(m，1h)，8.05-8.02(m，1h)，7.98-7.93(m，2h)，7.29(d,j＝7.96hz,2h),7.18(d,j＝7.88hz,2h),6.03(d,j＝7.96hz,1h),4.50-4.41(m,1h),3.79(t,j＝8.14,1h),3.55(d,j＝8.32hz,1h),2.80-2.65(m,2h),2.35(s,3h),2.19-2.13(m,2h),1.86-1.63(m,2h)ppm.ei-mscalc.forc25h21no5:415；found:415(m).实施例3本实施例主要测定本发明实施例2中的部分化合物对腺苷酸环化酶细胞的激动作用，以证明本发明提出的式(i)所示的化合物能在制备腺苷酸环化酶(ac2)激动剂及相关疾病治疗药物中应用。1、实验仪器与材料1.1仪器1.2主要试剂和药物(1)实施例2中的部分化合物；(2)阳性对照：forskolin:fsk标准品-sigma(hplc>98％)；(3)其他试剂：1.3药物配置fsk：用dmso稀释为50mm或10mm母液于-20°冰箱冻存，使用时按照试剂盒的要求，用stimulationbuffer稀释为所需浓度。1.4实验细胞人胚肾细胞hek293(hac1、hac2、hac5、hac8)基因稳定表达细胞株和对照稳转株(puro)构建于深圳市百恩维生物科技有限公司。hek93+hac细胞生长于高糖培养基(含谷氨酰胺)，辅之以10％的血清，2个ug/ml的puromycin，并在37℃恒温箱中以加湿5％的二氧化碳空气保持在恒温箱中。处理细胞后加入配好的stimulationbuffer(hbss1x,hepes1m,250mmibmx,bsastabilizer7.5％)重悬，调整至所需细胞浓度进行实验。2、实验方法2.1构建稳转细胞株分别合成基因hac1-myc、hac2-myc、hac5-myc、hac8-myc(c端带myc-tag)→分别构建到慢病毒载体plvx-cmv-pgk-puro上→酶切，测序鉴定→大提质粒→转染293t细胞包装慢病毒→慢病毒的纯化和滴度的测定→3个慢病毒分别感染hek293细胞→puro筛选转入外源基因的稳转细胞株→各挑选3株单克隆pcr鉴定hek-293稳转株→qpcr检测单克隆细胞株中目的基因的表达情况。2.2初筛设置3个组，分别为对照组(control组)，50μmfsk阳性对照组，50μm本发明的化合物初筛组，具体操作如下：(1)配置stimulationbuffer；(2)处理细胞，离心之后用buffer重悬，并调整密度为5*10∧4/ml(即每孔500cells,可根据实验调整)；(3)用stimulationbuffer将药物浓度稀释为100μm(终浓度为50μm)进行初筛；(4)取10μl细胞和药物于topsealtm-a-96板中，共20μl体系，孵育30min(封口)；(5)分别加入10uleu-camptracer和10ululight-anti-camp工作液孵，孵育60min(避光+封口)；(6)使用酶标仪测量荧光信号值(615和665nm)，通过标准曲线将荧光信号值转换为camp浓度。3、实验结果使用lanceultracampdetectionkit对本发明化合物进行小分子激动剂高通量筛选，测定本发明化合物分别在hek293+hac1、hac2、hac5、hac8细胞上的激动作用。实验结果数据显示(参见图1和表1中的数据)，本发明实施例设计的化合物对ac2细胞有激动选择性，在初筛终浓度为50μm时，本发明实施例设计的化合物在hek293+hac2细胞上的camp浓度显著升高，与阳性对照化合物fsk的camp浓度接近。表1为实施例2中的部分化合物对人胚肾hek293+hac2细胞的激动作用初筛数据化合物camp(nm)效率百分比佛司可林fsk(对照)53.35100％化合物10.17493.58％化合物314.5227.21％化合物429.6755.60％化合物523.8744.74％化合物631.8859.57％化合物723.7644.53％化合物86.540％化合物1017.0731.99％化合物122.695.04％化合物1334.6364.91％化合物1430.2356.66％化合物1531.4959.02％化合物1616.5330.98％化合物1737.7870.81％化合物1837.0669.46％化合物1933.0661.96％实施例4本实施例主要测定化合物1对2型腺苷酸环化酶(ac2)细胞的激动活性。1、实验仪器与材料参见实施例32、实验方法根据实施例3初筛所得信号值强弱，适当调整所用的细胞数，以获取量效曲线，如下操作：(1)取50mm母液5μl，加入495μlbuffer中稀释为500μm，接着按照protocol依次系列稀释(1nm-100μm)；(2)取10μl系列稀释药物和细胞至topsealtm-a-96板中，共20μl体系，孵育30min(封口)；(3)分别加入10uleu-camptracer和10ululight-anti-camp工作液孵，孵育60min(避光+封口)；(4)使用酶标仪测量荧光信号值(615和665nm)，通过标准曲线将荧光信号值转换为camp浓度。3、实验结果hek293+hac2细胞在化合物1的作用下，camp浓度随着化合物浓度的增加而增加，其激动活性值ec50为0.178±0.04101μm，相应fsk在hek293+hac2细胞上的ec50为2.215±0.06401μm，量效曲线图参见图2所示。综上，本发明提出的式(i)所示化合物是除了佛司可林之外的2型腺苷酸环化酶高效激活剂，并且可选择性激活2型腺苷酸环化酶，对其他腺苷酸环化酶跨膜亚型无明显激活作用或不激活。另外，本发明提出的式(i)所示化合物用作药物时，可以直接使用，也可以药物组合物的形式使用。当作为药物组合物使用时，该药物组合物含有0.1–99％，优选为0.5–90％的式(i)所示化合物，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用辅料(如：载体或赋形剂)。在此，可药用辅料(载体或赋形剂)是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、超填料以及药物制品的辅剂。本发明药物可用于作为2型腺苷酸环化酶激动剂、以及作为与2型腺苷酸环化酶相关的疾病(神经精神疾病、肺部疾病、气管疾病、支气管疾病)的治疗药物。以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。当前第1页12