目前传统的手术治疗很难彻底根除肿瘤组织,化疗是必要的辅助治疗手段。但由于血脑屏障(BBB)的存在,一方面化疗药物很难入脑,另一方面药物入脑后容易对正常脑组织产生毒副作用。
因为主动靶向长循环脂质体具有主动靶向性、缓释性、长循环性、低毒性和高稳定性等优点。因此有多肽修饰的主动靶向性长循环脂质体递药系统,使其携带自身带有荧光的联吡啶钉配合物靶向性入脑,透过血脑屏障的阻碍,并通过体外细胞实验和体内活体实验考察其抗肿瘤作用。具体如下：
一、 制备穿膜肽(RDP)修饰的长循环联吡啶钌配合物主动靶向脂质体，合成两种具有抗肿瘤作用的多吡啶类钉配合物,2.2’-联吡啶钌配合物和1.10-菲罗啉钌配合物,通过MTT法检测他们各自对肿瘤细胞的半数抑制率(IC50),选择2.2’-联吡啶钌配合物作为药物代表,进一步研究其抗肿瘤特性。
二、 将具有脑靶向作用的RDP与二硬脂酰基磷脂酰(DSPE-PEG-NHS)进行偶联,制成导向化合物DSPE-PEG-RDP。后采用薄膜分散法分别制备RDP修饰的2.2’-联吡啶钌配合物主动靶向脂质体(RDP-Ru-Lip, polypyridyl ruthenium complex liposome modified by RDP)和普通2.2’-联吡啶钌配合物脂质体。
三、 用激光粒度及Zeta电位仪、透射电镜、生物质谱仪和紫外分光光度计进行表征,考察其理化性质。通过透析法测定脂质体包封率,活体成像实验、倒置显微镜观察法、免疫荧光方法检验其靶向性,并通过MTT实验验证其对肿瘤细胞的影响。
四、 结果：RDP修饰后的2.2’-联吡啶钌配合物脂质体平均粒径为(94.56±5.97)nm,包封率为(78.86±2.78)%,而普通脂质体平均粒径为(90.20±2.23)nm,包封率为(79.62±±3.62)%,并且所制得的脂质体重现性高,稳定性良好。
通过活体成像实验表明经过RDP修饰的2.2'-联吡啶钌配合物长循环脂质体具有很好的脑靶向作用。通过荧光倒置显微镜观察和MTT细胞实验即3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐表明RDP修饰2.2’-联吡啶钌配合物脂质体具有明显的嗜神经性,能够选择性进入神经性细胞,IC50显著低于普通脂质体组和未经脂质体包裹的联吡啶钌配合物组。DAPI即4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色结果显示,脂质体携带药物进入细胞后,药物2.2’-联吡啶钌多数在胞浆中富集,极少进入细胞核内,推测其抗肿瘤作用主要在胞浆内发挥或启动。
因此，经RDP修饰的2.2’-联吡啶钌配合物长循环脂质体稳定可控,且具有明显的靶脑作用,体外抗肿瘤效果明显,有望成为靶向治疗脑部肿瘤疾病的良好药物载体。而制备的RDP-Ru-Lip理化性质良好,稳定可控,制备重现性高。其体外抗肿瘤细胞效果明显,并具有嗜神经性。能够快速透过血脑屏障,携带药物联吡啶钌靶向性入脑,提高药物浓度。
瑞禧生物是西北从事进口药用磷脂类产品及其相关产品销售为主的一家公司，公司目前经营的产品有进口合成磷脂，PEG修饰磷脂，聚乙二醇衍生产品，鞘氨醇，神经酰胺，鞘磷脂等产品。
关键词：
DSPE-PEG-RDP
DSPE-PEG-cRGD
DSPE-PEG-CRGD
DSPE-PEG-iRGD
DSPE-PEG-Angiopep
DSPE-PEG-TAT
DSPE-PEG2K-TAT
DSPE-PEG-RR-8靶向穿膜肽R8
DSPE-PEG-R8 磷脂-聚乙二醇-穿膜肽（八聚精氨酸(R8)）
DSPE-PEG-CD133 磷脂-聚乙二醇-CD133序列肽
γ-Folate-PEG-DSPE 磷脂-聚乙二醇-γ-Folate多肽
γ-Folate-PEG-DSPE-DOX磷脂聚乙二醇偶联γ-Folate多肽DOX
R8PLP-PEG-DSPE 磷脂-聚乙二醇-R8PLP多肽  
DSPE-PEG2000-ACPP磷脂-聚乙二醇-ACPP细胞穿膜肽
DSPE-PEG2000-YSA肽 磷脂-聚乙二醇-YSA肽
DSPE-PEG-AEYLR磷脂-聚乙二醇-小肽修饰脂质体
磷脂-聚乙二醇-光响应性细胞穿透肽pCPP-PEG-DSPE
Sc Fv-PEG2000-DSPE磷脂-聚乙二醇-靶向肽Sc Fv
DSPE—PEG-ATWLPPR 磷脂-聚乙二醇-ATWLPPR配体寡肽
DSPE-PEG2000-CpG 磷脂-聚乙二醇-CpG抗原肽
DSPE—PEG-D-PMIα 磷脂-聚乙二醇-D型多肽D-PMIα
DMPE-PEG5000-pCF1-CFTR 磷脂-聚乙二醇-pCF1-CFTR靶向肽
DMPE-PEG-PDGFR-beta 磷脂-聚乙二醇-PDGFR-beta靶向肽
DSPE—PEG-CSF多肽 磷脂-聚乙二醇-CSF多肽
DSPE—PEG-An1多肽 磷脂-聚乙二醇-An1多肽
DSPE-PEG2000-B6 磷脂-聚乙二醇-细胞穿透肽B6
LCDX-PEG-DSPE 磷脂-聚乙二醇-L型多肽LCDX
DSPE-PEG3500-AGYLL-GHINLHHLAHL(Aib)HHIL多肽（PH敏感性多肽）
DSPE-PEG-GNGRGGYC 磷脂-聚乙二醇-GNGRGGYC序列肽
DSPE-PEG-GNGRGGVRSSSRTPSDKYC 
磷脂-聚乙二醇-GNGRGGVRSSSRTPSDKYC序列肽
HE2-PEG2000-DSPE磷脂-聚乙二醇-多肽
DSPE-PEG-FGF-21多肽 磷脂-聚乙二醇-FGF-21多肽
DSPE-PEG-ApoL1多肽 磷脂-聚乙二醇-ApoL1多肽
DSPE-PEG-GRF磷脂聚乙二醇生长调节因子多肽
多肽药物T-20-PEG-DSPE 磷脂聚乙二醇化T20多肽
DSPE-PEG2000-RVG29PPP(D-RVG29)磷脂聚乙二醇嗜神经性病毒衍生肽
DSPE-PEG2000-OME(D-OME) 磷脂-聚乙二醇-OME序列肽
DSPE-PEG-H102多肽 磷脂-聚乙二醇-靶向肽H102
E7抗原多肽聚乙二醇化磷脂DSPE-PEG-E7抗原多肽
OT-1多肽聚乙二醇磷脂DSPE-PEG-OT-1多肽
DSPE-PEG-T1249多肽 磷脂-聚乙二醇-T1249多肽
DSPE-PEG-拟胰岛素多肽 磷脂-聚乙二醇-拟胰岛素多肽 
HBVpreS1/2-21myr-PEG2000-DSPE 磷脂-聚乙二醇-HBVpreS1/2-21myr多肽
DSPE-PEG-preS1多肽 磷脂-聚乙二醇-preS1多肽
DSPE-PEG-HBVpreS1 磷脂-聚乙二醇-HBVpreS1 多肽
DSPE-PEG2000-CRGDK 磷脂-聚乙二醇-CRGDK多肽序列
RGERPPR-PEG-DSPE 磷脂-聚乙二醇-RGERPPR序列肽 DSPE-PEG3400-RGERPPR
DSPE-PEG-NGR-CD13 磷脂-聚乙二醇-抗肿瘤活性肽CD13
DSPE-PEG-iNGR 磷脂-聚乙二醇-多肽iNGR DSPE-PEG-CRNGRGPDC
DSPE-PEG-FAL 磷脂-聚乙二醇-FAL多肽
DSPE-PEG-FL 磷脂-聚乙二醇-FL多肽
DSPE-PEG-多肽pHLIP 磷脂-聚乙二醇-pHLIP低pH插入肽
DSPE-PEG-c(RGDyK)环状多肽配体 磷脂-聚乙二醇-环状多肽配体