CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)荧光探针 CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)，细胞膜电位荧光探针 CAS#：70363-83-6 英文名：Bis(1,3-dibutylbarbituric acid)trimethine oxonol 分子式：C27H39N4O6 分子量：515.62 结构式： 性质： 1. 外观：红色粉末 2. 纯度：≥98% 3. 产品描述： DiBAC4(3)是一种检测细胞膜电位的亲脂性阴离子荧光染料，它本身无荧光，当进人细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光。DiBAC4(3)进入细胞，细胞内荧光强度增加，即膜电位增加表示细胞去极化；反之，细胞内荧光强度降低即膜电位降低表示细胞超极化。 4. 溶解及使用方法： 可以使用DMSO、无水乙醇和纯水溶解，用DMSO溶解成10mM的母液储存，如果低浓度也可以满足要求也可用纯水溶解。 I. 用荧光显微镜测定膜电位的方法 （1）试剂 ·DiBAC4(3) ·Dulbecco’s MEM (DMEM) ·FBS (fetal bovine serum) （2）方法 1) 将消化好的细胞移至DMEM中。 2) 加入FBS，控制浓度范围在：2～15% 。 3) 加入DiBAC4(3)，控制浓度范围在：1～5 µmol/L。 4) 用荧光显微镜观察刺激后荧光强度的变化。[Ar激光(488 nm) 的激光共聚焦显微镜]，由于DiBAC4(3)的荧光会随温度变化而改变，所以必须在37℃的条件下测定。由于细胞膜的电位会变化，可以观察细胞质内的荧光强度变化。  II. 用酶标仪测定膜电位的方法 （1）试剂 ·DiBAC4(3) 检测用缓冲液 (pH7.4; 20 mmol/L HEPES, 120 mmol/L NaCl, 2 mmol/L KCl, 2 mmol/L CaCl2, 1 mmol/L MgCl2,5 mmol/L glucose) （2）方法 1) 培养细胞：在微孔板中培养细胞 2) 清洗细胞：用含5 µmol/L DiBAC4(3) 的检测用缓冲液200 µL，清洗微孔板中培养的细胞2次 3) 染色：在孔板中加入180 µL含5 µmol/L DiBAC4(3) 的检测用缓冲液，在5%CO2，37℃培养箱中孵育30分钟。 4) 测定：用荧光酶标仪观察刺激后荧光强度的变化。由于DiBAC4(3)的荧光会随温度变化而改变，所以必须在37℃的条件下测定，加入20 µL含DiBAC4(3) 的检测用缓冲液，每隔30秒测定1次荧光变化。  III. 膜电位的标准曲线 （1）原理 膜电位变化时色素的分布也随之变化，所以荧光和吸收也会变化。这种变化程度取决于色素的分子数和细胞数的比率、色素的浓度以及细胞的种类。膜电位的标准曲线是通过用电极直接测定目的细胞的膜电位，在该电位所测得的荧光和吸收强度而制得的。  （2）试剂 ·DiBAC4(3) ·Eagle-Dulbecco medium ·PBS （3）方法 1) 用Eagle-Dulbecco medium培养细胞。 2) 取PBS中的细胞在37℃的CO2培养箱中孵育30～60分钟，然后改变孵育时间，制备不一样的CO2浓度的样品。 3) 加入DiBAC4(3)，终浓度为2 µmol/L。 4) 20分钟后，在517 nm测定各个浓度的荧光强度，并用电极直接测定此时的电位差。 5) 用荧光强度和对应的电位差来制作标准曲线。  （4）其他方法 有钾扩散电位和荧光或吸收强度比较的方法。缬氨霉素引起钾扩散电位，钾扩散电位 (V) 是按照Nernst 方程计算如下： V= -RT／F log[K+]in／[K+]out = -59 log[K+]in／[K+]out (mV)  所以在缬氨霉素存在时，通过改变细胞外钾离子浓度和细胞内钾离子浓度，计算扩散电位，测定各个电位的荧光或吸收强度，比较后可以得到标准曲线。 储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。 供应商：瑞禧生物 CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)荧光探针 订购说明： 1、大部分产品有现货，正常情况下都能当日发货。 2、部分非常用产品，根据合成难易程度，货期2-4周，海外期货则需要提前3-6周预订。 3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。 4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。   运输说明： 极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰，再用泡沫盒密封，放入的箱子，然后交付给合作快递，安全快速的送至您的手中，保证产品的性质稳定如一。 低温产品：低温产品运输过程中加装冰袋，再用泡沫盒密封，再放入的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速的送至您的手中，保证产品的性质稳定如一。 常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，安全快速的送达您的手中。 CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)荧光探针