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HRP过氧化物酶,Biotin生物素,FITC荧光素,琼脂糖珠的抗体偶联标记

作者:瑞禧生物 发布时间:2023-01-29 10:37:01 次浏览

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抗体偶联标记,是以共价偶联的方式将特定的标记基团连接在抗体上的一种标记技术。
抗体是怎么被生物素,荧光,辣根过氧化物酶,磁珠,琼脂糖珠偶联标记上的?抗体偶联标记中的共价化学键是如何形成?以下内容为你解答:
抗体偶联标记相比于抗体标记,多了 “偶联(conjugation)” 一词,特指抗体和标记基团之间是通过共价键连接而成。抗体的标记除了共价标记之外,也可以通过非共价的亲和作用力来标记,比如利用能特异结合抗体的 Fc 端的含有标记物的大分子(如 HRP-Protein A 等)同抗体进行结合标记。虽然非共价标记操作相对简单,但抗体偶联标记还是以其更稳定的共价化学键和更低的背景信号成为了抗体标记方法中应用最广的技术。
 那么抗体偶联标记中的共价化学键是如何形成的呢?跟其他化学反应类似,共价键是两个底物在合适的条件下发生化学反应得到。抗体这个大分子蛋白上最常用的反应基团包括:氨基、巯基和羧基(图 1)。
抗体偶联标记HRP过氧化物酶,Biotin生物素,FITC荧光素的作用
若偶联在抗体上的基团是荧光染料、荧光蛋白等标记物,偶联后的抗体可以用来做流式细胞术 FACS 、IF、活体成像等标记示踪类实验。若被偶联在抗体上的是 HRP、AP 等酶类,偶联后的抗体可以直接跟检测底物反应,用于 ELISA、WB、IHC 等试验检测。若被偶联的基团是 Biotin,偶联的抗体可以再同酶联亲和素或酶联 Anti-Biotin 抗体反应若抗体直接被偶联在磁珠、琼脂糖珠等固相介质上;或通过抗体生物素化,再与链霉亲和素介质结合后,则能用于靶蛋白复合物亲和纯化,及其蛋白相互作用研究中。
提供定制各种抗体偶联标记物,主要提供以下四大类
1.抗体偶联标记荧光染料、荧光蛋白。
2.抗体偶联标记HRP、AP 等酶类。
3.抗体偶联标记Biotin生物素。
4.抗体偶联标记磁珠、琼脂糖珠等固相介质上。
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